Re: [問題] 國外寄來ㄉsample
※ 引述《gilchang (到頭來只是個墻外行人)》之銘言:
> ※ 引述《littleantant.bbs@ptt.cc (一隻小螞蟻)》之銘言:
> > 請教一下:
> > 老闆丟了一個sample給我,是從國外要來的plasmid,好像是直接點在3M membrane上,
> > 我的想法是直接把3M membrane放入tube內,加入65度C加溫的水或TE buffer,incubation
> > 數小時後,取出跟competent cell mix利用heat shock的方式送入E. coli保存,
> > 再利用抗生素篩選抽Plasmid,可是上次的經驗是失敗了,因為Plate根本沒有菌落長出來,
> > 證明我elute DNA失敗,想請問各位前輩有沒從這種paper上elute DNA之經驗,可以傳授一下
> > 嗎?
1. 基本上只要剪一小片有點到的membrane就夠了
2. 用TE Buffer或二次水再eppendorff慢慢溶就好就好(應該不需要用65度c的)
Transformation後 先不要丟就放著繼續溶 等菌長出來抽到plasmid再說
3. 請確認抗生素是否用對!
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夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子
之器不得已而用之恬淡為上勝而不美而美之者是樂殺人夫樂殺人者則不可得志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以
喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知止知止可以不殆譬道之在天下 192.192.9.1海
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