[問題] mouse tissue RNA
有人利用Trizol抽過老鼠tissue RNA嗎
我是先作thymus和spleen這兩種tissue
先把organ磨碎取得suspension cell
之後再把cell離心下來用Trizol lyse
第一次有先算細胞1ml Trizol / 10^7cell
結果沉澱完沒有pellet完全沒有東西
第二次提高濃度1ml Trizol / 4x10^7
沉澱完有看到小小的pellet 溶到15ul的DEPC-H20
測量濃度以後發現rna超少的
total大概只有2ug-5ug
跑個小gel幾乎也都用完
後來發現RNA degrade的很嚴重
smear很嚴重 28s和12s的signal弱弱的比例也不正常
之後還要作northern blot
這樣的量真的是超級少的吧 T_T
想請問大家..
(1) tissue RNA的抽法有什麼比較需要注意的嗎
(2) 又哪裡可以找到一般mouse tissue抽出來RNA的量"應該"多少的資訊
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