Re: [請問]細胞污染要如何處理??
※ 引述《jingner (jingner)》之銘言:
: 我直接過來這裡問了^^""
: 打散離心可能是一種方法
: 不過我還想問
: 我家用的是RPMI+PS+FBS
: 那有沒有實驗室用的是別種抗生素??
: 補充一下
: 如果我看到爆發後的"汙染"
: 是絕不會留下的
: 問題是 在好好的時候 大家來看都覺得它是OK的
: 可是我就會覺得它其實有問題 只是菌的population
: 還沒到"爆發"的時候
: 於是我只得顫顫兢兢的養 勤換medium
: 可是不敢凍他 所以心理壓力很大
: 老師也不太信任我的細胞
: 所以叫我多找找有沒有藥可以處理
: 謝謝大家幫忙了........(叩謝)
: ※ 引述《apa9394 (apa)》之銘言:
: : 我的細胞是挑了很久的stable clone
: : 解凍後卻出現一種現象
: : 就是"污染"
: : 看起來會整盤沙沙的
: : 仔細看有很多長短不一的
: : 應該是細菌還是桿菌之類的東西
: : 而且游動的很快.....Orz
: : 通常都在第三天突然"爆發"
: : 只要在第二天換medium就沒事
: : 我的clone還有價puromycin篩選
: : 想請問有沒有人知道有藥可以處理污染的細胞??
: : 要不然就得重做......Orz
說真的我不認為離心真的可行
因為原po的培養基中應該已經加了抗生素了
所以會爆發出來表示這些細菌已經有抗藥性了
離心雖然能將部分的細菌與細胞分離
但是不可能到達百分之百
而細菌的生長速度絕對是細胞的數十倍以上
只是細菌很小所以在量少的時候並不容易被觀察到
但並不表示他們被抑制住了
所以建議原po與其花時間是這些不太可能成功的事情還是砍掉重練比較快
至於想用別的抗生素殺菌
這老實說我也試過了
當時我先利用PBS將懸幅的細菌洗掉
洗了三次洗到細胞都變形了
才用trypsin將細胞打下離心之後
在培養的培養基中除了原本的PS之外
我加入了抗黴菌的fungizon 和其他三種抗生素其中包括了萬古黴素
劑量是正常使用量的兩倍
結果令人失望的
污染還是在兩天後就又爆發了
所以真的不建議原po在浪費時間在這上面了
砍掉重練真的比較快
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