Re: [請問]細胞污染要如何處理??

看板Biotech (生命科學)作者jingner (jingner)時間19年前 (2006/05/10 13:16)推噓0(0推 0噓 0→)

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真的很謝謝O大你真是一語命中我的痛....>.< 我也知道污染了幾乎就沒得救了因此我老師也很頭痛他也不捨得我再重做我已經碩一下了所以吩咐我多問問有沒有方法解決當然如果沒法子解決就得重做了Orz 目前的問題是當大家都說他看起來沒事的時候我怎麼捨得丟掉呢?? 只是我覺得他怪怪的於是就說我已經神經質了冏rz 我又怕我偷懶沒換medium 又污染了我應該是全實驗室最浪費medium的人了哈哈 ※ 引述《oplz (Go Heat! Win for Riley!)》之銘言： : ※ 引述《Jingner.bbs@bbs.badcow.com.tw (空手打小強XD)》之銘言： : : 我的細胞是挑了很久的stable clone : ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ : : 解凍後卻出現一種現象 : : 就是"污染" : : 看起來會整盤沙沙的 : : 仔細看有很多長短不一的 : : 應該是細菌還是桿菌之類的東西 : : 而且游動的很快.....Orz : : 通常都在第三天突然"爆發" : : 只要在第二天換medium就沒事 : : 我的clone還有價puromycin篩選 : : 想請問有沒有人知道有藥可以處理污染的細胞?? : : 要不然就得重做......Orz : 很多人喊砍掉重練之類的話, : 不過我想養過細胞的人多少也知道污染後很難救回來 : 問題在原 po 也說了這是挑了很久的 stable clone, : 再說 stable cell line 個個不同, : 說真的搞不好你一輩子也才有這一次機會拿到現在這支 stable line, : 所以才不捨得就這樣放棄, 上來問有沒有其它的辦法. : 今天有沒有可能救得回來? 機會還是有的, : 看敘述其實應該多少 antibiotic 還是有些壓制的效果只是不夠 : passage 時離心打散多重覆幾次, : 貼附好後每隔幾小時就用 medium/pbs 洗幾次換 medium : 重覆幾天, passage 時細胞鋪稀一點, 分在不同 well 中. 這些都有幫助 : 另外離心時減低離心速度與時間, 因為細胞比細菌容易離下來, 也可以減低細菌的量. : 如果可以找個高倍一點的顯微鏡觀察一下. : 污染時比較麻煩的不是 medium 裡的細菌洗不乾淨, : 是貼附在細胞表面的菌很難在 passage 時一併去掉 : 所以要連續密集 passage 來慢慢減低這些細菌很難一次 passage 多洗幾次就乾淨的. : 我身邊有人這樣成功救回 cell 過, 我也成功過. : 講這些都比喊個砍掉重練這樣一句話有建設性得多. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.213.164 ※ 編輯: jingner 來自: 140.120.213.164 (05/10 13:26)