關於cloning的問題...
我的selectable marker是kanamycin...
查閱網路上的一般用量是50ug/ml...
也有人說過...kanamycin很強...所以可以減少用量...
想請問有經驗的人, 如果增加用量 (如100ug/ml) 是否可能會殺死所有的菌...
還是可以提高篩選的成功率??
另外, 由於一直clone不到某一基因...(而每一個步驟都蠻確定沒有問題...
也都作了各種control)
所以懷疑, 該基因對細菌本身可能有毒性...
請問, 如果真的是如此, 那該怎麼辦呢?? 是否就沒有機會clone這個基因了??
PS. 目前使用的strain為DH5alpha
先謝過~~:)
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