Re: [問題] 關於primer-dimer
※ 引述《tornwing.bbs@ptt.cc (把賤格的份好好活下去..)》之銘言：
> 就是RT-PCR的產物去跑電泳阿
> 有時會發現最底下會有primer-dimer的存在
> 當dimer較亮時
> 會發現你所要看的表現的band會暗許多
> 情況不一定
> 有時重P會改善..但有時反而更慘
> 要怎樣才能避免dimer的出現
> 或是說根本沒差不用管他
> 是因為primer太多..所以自己聚合還是
> 根本沒夾到你的cDNA或是夾不到
> 我一樣是跑35個cycle
> 但是那些cycle所需時間與taq等藥品都是照protocol做的
> 我也不是很懂
> 拜託諸位強者了
建議先用電腦軟體跑看看會不會出現primer-dimer
然後計算Tm值, 以Tm-5來當annealing temp.
這樣試試看吧!
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夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子
之器不得已而用之恬淡為上勝而不美而美之者是樂殺人夫樂殺人者則不可得志於天下
矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以
喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫
之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知止知止可以不殆譬道之在天下140.109.32.9海
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