[問題] PCR question

看板Biotech (生命科學)作者 (星光)時間19年前 (2006/05/22 20:28), 編輯推噓2(200)
留言2則, 2人參與, 最新討論串1/1
hi hi 之前post這請教各位有關萃DNA的問題 後來我的DNA OD260/OD280 皆 在 ≧1.8以上 也就是DNA/RNA 的純度夠高了 因此我已經確定了 萃DNA這步驟應該是沒有問題了 接著跑 pcr 問題也都可以解決了 也沒有再看到smear的問題了 但是 套在其它的細菌就又出現smear (DNA純度1.8以上) 我開始懷疑是不是primer 的問題 但如果是引子的問題 應該不會有的菌不會出現smear 有的菌卻出現了 我的primer 的濃度是5μM 取1λ 總體積是50λ DNA 是 10μg/ml 取 1λ總體積是50λ anneling 55℃ 30 cycle Taq 是 Protech 麻煩各位熟悉PCR的前輩 給我建議 感激不盡(快被鬼DNA搞死的阿呆鬼~~~~嗚) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.117.91.148

05/23 18:25, , 1F
試試gradient PCR 尋找黏合最佳溫度
05/23 18:25, 1F

05/26 17:06, , 2F
沒錯...有可能是annealing temp不是最適溫度...提高一點試렠
05/26 17:06, 2F
文章代碼(AID): #14SQvxFv (Biotech)
文章代碼(AID): #14SQvxFv (Biotech)