Re: [問題] 請問組織冷凍切片怎麼做呢....?

看板Biotech (生命科學)作者eriel (橘子數)時間19年前 (2006/06/07 22:23)推噓1(1推 0噓 0→)

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以前有一個古道熱腸的學長曾經教過我，切起來很漂亮，但是很麻煩材料：OCT（最好是櫻花牌的）、鋁箔紙、麥克筆、CPU上面的不要的散熱鋁座、乾冰方法：先將鋁箔紙剪成長條狀不需太寬，大概0.5-0.9公分，圍著麥克筆桿，然後貼起來成為一個空洞圓圈。樣本若是含水量很多的如腦組織，先以蔗糖序列脫水後再擦乾，然後覆蓋保鮮膜，凍於-20C，兩小時後再凍到-80C，兩到四小時後取出取出前先用乾冰將鋁座降溫，此時鋁座會發出尖叫聲，等聲音停止後就達到低溫狀態乾冰貼附在鋁座旁保持低溫，然後擠出一點OCT在鋁座上，趁尚未完全凝固前放上樣本此時可調整任意方位（看是要站要躺都行）方位調整好，OCT也凝固了，所以不用擔心樣本會移位，再將鋁箔圈圈套上，注入OCT直到覆蓋樣本，待OCT完全成為乳白色後即可拔除樣本，凍於-80C。這樣較傳統方法的好處是，調整樣本的角度方位都很容易，也不必擔心注入OCT後會跑掉此外乾冰的溫度較液態氮高，比較不會讓OCT快速凝固，切起來也比較不會裂開缺點是乾冰不易保存，所以每次要包埋就要去買乾冰，而台南只有一個地方在賣乾冰我有想過用網子把乾冰包起來進液態氮桶，結果掉在裡面...... ※ 引述《ooo2 (長的太帥不好.呵呵)》之銘言： : 請教各位組織冷凍切片怎麼做呢.... : 拜託各位教導一下.... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.144.170