Re: [問題] IP的wash
※ 引述《rpmi1640 (=v=)》之銘言:
: ※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言:
: : 加 normal serum 去 block?
: : 這是我第一個想到的
: 可是protein G bead非特異性bind的protein是指IP/WESTERN所要測的蛋白(細胞內的
: 一種蛋白) 而不是Antibody耶
: 用normal serum 去 block會不會把protein G bead 所有的Ab的接點都block掉
: 而無法抓我要的那個Ab-Ag complex 還是說適量(一點點)的加入還是可以的
當然不會啦 這位先生你會錯意囉...
blocking後 再加新的beads就好啦..
這就是所謂的pre-clear...........
原則上 若還是會non-specific bindinig
可以提高wash次數 或提高salt conc..
再不行 就用RIPA吧 跟她拼了 哈哈..
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