Re: [問題] quantitative/semi-quantitative RT-PCR
※ 引述《CErline (草螟仔弄雞公)》之銘言:
: ※ 引述《BLACK13 ( )》之銘言:
: : 我想問此兩種有無區別~~
: : 查資料查到快哭了~~
: 這樣解釋不知道對不對……
: PCR 要定量不是只跑膠看它的亮度,
: 應該要一起跑一個 house keeping gene然後再去比copy number
: 如果只是跑個膠讓 a和 b兩個 band比表現量,大概都只能算半定量……
不對
semi-quantitative RT-PCR 是必須將已知濃度的template等倍數稀釋
分別去跑PCR,依照強弱作出一條檢量線
再以內差法算出未知樣品的量
但是說的倒簡單,PCR有saturation的問題
semi-quantitative RT-PCR仍然沒辦法解決,所以很少人用此方法
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