Re: [問題] 有關commercial plasmid的問題...

看板Biotech (生命科學)作者 (有氣質的台客)時間19年前 (2006/07/24 23:21), 編輯推噓5(507)
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※ 引述《siberianiris (紫色鳶尾花~)》之銘言: : 今天學姊問我一個關於commercial plasmid的問題 : 他從別的實驗室要到一種買來的plasmid : 產品網址如下: : http://www.stratagene.com/products/showProduct.aspx?pid=471 : 就是上面網址的PathDetectR Cis-Reporting Systems : 其中的 NF-kB Cis-Reporter Plasmid : 他問 自己在E coli複製大量後 怎麼去確認? : 就是問說 要用哪兩個restriction enzyme去切下insert? : 我有看完整份說明書 但是沒有找到他是用哪兩種RE... : 而那個plasmid只有找到map... 還有vector的序列而已... : 想請問板上的學長姊是否知道該怎麼去查? : 先說聲謝謝 希望可以給小的一點點指示... : 很想知道 但是想不出來>_< 通常不是這樣check... 我看你應該是要看NF-kB活化的情形 但是你不知道這個plasmid能用否? 要怎麼知道? 做個positive control不就得了? 通常是用LPS... -- http://0rz.net/da0PG 我的相簿.... 興趣:做實驗、看PAPER、玩音響、聽音樂、養楓葉鼠、彈鋼琴 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165

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而且買來的通常不會有錯,尤其是向Strategene這種大廠
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真要check,設primer定序,看是否跟廠商說的序列一致
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我看vector map上MCS中有6個RE切點...那如果是原本廠
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商賣的plasmid MCS部分是整個被enhance element置換
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掉嗎?^^"
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用RE check plasmid是簡單而常用的方法之一
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通常insert是塞進MCS之中 不知道這樣提示是否可以想出如何切
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出insert? 原po的問題是學姐給的回家作業嗎?
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對押 可是買來的plasmid上 我找不到是那兩個RE切點
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不是作業 是學姊實驗上遇到的問題 他們已經解決~
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但是我有問怎麼解決 可是學姊說太複雜我不需要知道
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可是我還是很想知道^^:我不好意思一直多問~
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文章代碼(AID): #14nELkPl (Biotech)
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