Re: [問題]SDS PAGE的stacking gel原理
※ 引述《madaycheer (peace)》之銘言：
: 我被學長問了一個問題
: 他問:為什麼SDS PAGE的stacking gel可以使sample壓成一條線?
: 為什麼?為什麼?為什麼?> <
electrode buffer裡頭的glycine(pI~6.0)在stacking gel(pH~6.8)呈現中性帶負電
跑在sample的最後面..而Cl-因為極大的charge to mass跑在sample的最前面
兩者一前一後形成leading and trailing ion fronts
此時sample為了維持相同的電流(我們觀察到的電流是連續的)
就會快速地向前追趕Cl-...形成一個堆擠的動作
等到這三者進入running gel(pH~9.2)後..glycine因為負電增加
跑到sample前面..此時同樣為了維持相同的電流量
sample突然變慢..加上running gel裡頭acrylamide的濃度較高
所以gel pores較緊密也會對sample造成阻擋的現象
所以就好像緊急煞車一樣sample就被壓擠成了一條線
裡頭結合了許多基礎學問..例如歐姆定律..泳動率等等
可以自己再仔細深入!
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 222.156.11.129
推
02/27 22:00,
6年前
, 1F
02/27 22:00, 1F
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