[問題] Liposome 跟 電穿孔送質體至哺乳動物細胞的效率

看板Biotech (生命科學)作者 (事在人為,非環境為)時間19年前 (2006/09/12 00:03), 編輯推噓3(300)
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今天meeting的時候, 跟老闆談到這liposome跟eletroporesis兩種方法的效率問題 在in vitro的情況對於貼附細胞的處理。 老闆說他聽到的是電的效率好,但是因為機器本身的購置成本貴, 所以大家普遍採用Liposome來送plasmid。 但是我看到的文獻跟同學間互相打聽的情況, Liposome的效率反而多在50%以上,甚至有到80~90%。 而且細胞毒性的問題在某些廠商的DM上也說了有效的降低。 同學們的實驗室也普遍用Liposome在送plasmid。 而從X Cell的操作手冊上回去找referenece, 看到的效率並未如liposome一樣好。 雖然在細胞膜上打洞使螢光微粒進入細胞的效率也不低, 但是plasmid gene的表現量卻..........cuvette的價錢也.......50個/8.7k.... 其他實驗室的學姊電HL-60的效率也在兩三成上下。 我們實驗室兩者都還沒做過,都想要嘗試看看(事關我的畢業...已經延了XD) 想請教版上的各位先進幾個問題, 對於表現plsmid的效率,在各位的操作經驗裡究竟哪一種方法效果比較好? 我是比較偏愛Liposome啦!因為我覺得電的效果跟對細胞的傷害實在是....... 這樣又有另外的問題了,與liposome相比電穿孔法的又有何優點? 我有找到一些資料但是可能還是不夠完備。 對於一些特殊的細胞或是linear plasmid的效率比較高, 如:dendritic cell / Embryonic Stem Cell 是否電的比較容易發生homologous recombination? 所以比較容易形成Stable clone? in vivo的情況,電也會促使plasmid表現,增加DNA vaccine的活性。(近期都偏重這裡) 除此之外,電穿孔法還有其他優點嗎? 以上疑問還懇請版上各位先進能幫忙解答,謝謝。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 218.171.153.47

09/12 00:34, , 1F
gene pluser不過30萬,算值得 cuvette一支才200,還可以reuse
09/12 00:34, 1F

09/12 01:13, , 2F
因細胞而異,electroporation大多用於懸浮性細胞
09/12 01:13, 2F

09/12 01:17, , 3F
聽到也是這樣 不過我偏偏要挑戰沒內建的貼的 (抖)
09/12 01:17, 3F
文章代碼(AID): #151OYreO (Biotech)
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