[問題] Liposome 跟 電穿孔送質體至哺乳動物細胞的效率
今天meeting的時候,
跟老闆談到這liposome跟eletroporesis兩種方法的效率問題
在in vitro的情況對於貼附細胞的處理。
老闆說他聽到的是電的效率好,但是因為機器本身的購置成本貴,
所以大家普遍採用Liposome來送plasmid。
但是我看到的文獻跟同學間互相打聽的情況,
Liposome的效率反而多在50%以上,甚至有到80~90%。
而且細胞毒性的問題在某些廠商的DM上也說了有效的降低。
同學們的實驗室也普遍用Liposome在送plasmid。
而從X Cell的操作手冊上回去找referenece,
看到的效率並未如liposome一樣好。
雖然在細胞膜上打洞使螢光微粒進入細胞的效率也不低,
但是plasmid gene的表現量卻..........cuvette的價錢也.......50個/8.7k....
其他實驗室的學姊電HL-60的效率也在兩三成上下。
我們實驗室兩者都還沒做過,都想要嘗試看看(事關我的畢業...已經延了XD)
想請教版上的各位先進幾個問題,
對於表現plsmid的效率,在各位的操作經驗裡究竟哪一種方法效果比較好?
我是比較偏愛Liposome啦!因為我覺得電的效果跟對細胞的傷害實在是.......
這樣又有另外的問題了,與liposome相比電穿孔法的又有何優點?
我有找到一些資料但是可能還是不夠完備。
對於一些特殊的細胞或是linear plasmid的效率比較高,
如:dendritic cell / Embryonic Stem Cell
是否電的比較容易發生homologous recombination? 所以比較容易形成Stable clone?
in vivo的情況,電也會促使plasmid表現,增加DNA vaccine的活性。(近期都偏重這裡)
除此之外,電穿孔法還有其他優點嗎?
以上疑問還懇請版上各位先進能幫忙解答,謝謝。
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