Re: [問題] 有關Transformation
可以試試看 google :
plasmid
heat-shock
competent cells
transformation
trouble-shooting
problems
這些 key word 的組合。
就會找到很多解答了。
另外heat shock cells製作方式在Molecular cloning等書上面都有。
作法有很多種，但是都大同小異，選一個喜歡的吧。
因為你的資料講得不是很詳細，
所以我只能猜猜看你犯了什麼錯誤步驟。
看看有沒有猜對。
因為 heat shock cells 對溫度的轉變很敏感，
如果是平常存在 -80 C，要用的時候不是要稍微解凍一下嗎？
但是如果那個tube裡面的cell沒有一次用完，
下次要用往往就會不能用了。
因為經不起這樣解凍又冷凍解凍又冷凍的過程。
所以最好是在一開始製作的時候就分裝成小管，
每管剛好用一次。
這是heat shock比較容易出問題的地方。
加油！
※ 引述《ninelives (加油!!)》之銘言：
: 請問transformation 如果菌太多的話
: 塗盤 有沒有可能看起來像是什麼東西都長?
: XL-1 blue若想要用heat shock去做transformation
: 需要做什麼前處裡 例如:用CaCl2?
: 之前做transformation 都長很多
: 結果有一次就突然都沒看到colonies
: 希望各位大大可以提供些意見 謝謝^^
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