Re: [問題] 有關protein expression vector (pET s …

看板Biotech (生命科學)作者 (VIP好人卡....)時間19年前 (2006/12/05 14:41), 編輯推噓1(100)
留言1則, 1人參與, 最新討論串3/3 (看更多)
※ 引述《lentivirus ()》之銘言: : 大家好... : 最近在做cloning的時候不是很順... : vector:pET-21b : 好不容易ligation-transformation後長出colony : 但是搖5ml菌液抽plasmid結果確是空的... : 不知道大家有沒有類似的經驗.... : 有可能是大部分的能量都拿去做蛋白了...質體複製的少... : 不過我有去測濃度...每ul還有20ng...這就蠻怪的... : 想請教大家..在做這些蛋白表現的construction有什麼要特別注意的... : 謝謝大家囉 ^_^ 可能長出來的colony都是雜菌吧.... 抗生素濃度不夠或是培養時間過長,都會讓你的plate上長出雜菌 建議你可以準備兩個plate,一個塗沒有transform的comp. cell 另一個才是塗有transform的菌,這樣比較能知道所長出來的是不是雜菌 至於你說的測濃度有DNA...有可能是你抽DNA的時候contaminant到細菌的 genomic DNA. -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.96.172

12/05 19:57, , 1F
r
12/05 19:57, 1F
文章代碼(AID): #15THIA41 (Biotech)
文章代碼(AID): #15THIA41 (Biotech)