Re: [問題] 想請教關於Inclusion body純化的問題

看板Biotech (生命科學)作者Fourfish (～四條魚～)時間19年前 (2007/01/04 20:35)推噓0(0推 0噓 1→)

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先謝謝兩位的指點了><" : 推 chiehgriffin:可以用TOF看看是那一個蛋白質 01/04 10:58 : → chiehgriffin:做疫苗？那您應該是NHRI的人嚕? 01/04 11:00 : 推 chiehgriffin:可以試試低溫表現，可能對soluble form有幫助 01/04 11:03 我不是NHRI的耶... 我現在只是個正在學習的大學生而已所以還有很多東西不懂需要前輩們的指點^^" TOF??是荷質分析的儀器嗎@@?? 如果是的話....可能就沒辦法了...因為學校這裡沒有.. 至於低溫表現我有考慮過可是想了一下因為我的protein並沒有tag可以用column純化... 所以變成soluble form...純化可能會變的更麻煩.... : 推 HXZ:比較non-induciton和induction的SDSPAGE可以知道那兩條band 01/04 12:25 : → HXZ:是不是其實都是你induce出來的...是的話就放心去打ab吧 01/04 12:26 : 推 HXZ:剛剛仔細看一下你的描述我想很有可能是sample denature不完全 01/04 12:30 HXZ大大推文的第一句提醒了我... 我回頭仔細去看之前留下來的data 才發現...含重組vector的 non-induction的有小的那條 induction的大、小兩條都有還有...空vector的無論non-induction或induction卻兩條都沒有 ^^^^^^^^（即vector不含insert DNA，直接transformation）那...那這樣是什麼回事...><" 兩條都是我的protein？？而會有兩條band是因為induce後大量表現 folding錯誤... 再加上跑SDS PAGE前的denature不完全而跑出這樣的結果@@?? 這樣推論有可能嗎？如果是的話我該怎麼denature完全而做確認？加熱久一點有用嗎？謝謝另外也謝謝boblu大大的建議只是用這個vector做頗久了...做到現在要馬上放棄有點困難><" 而且覺得只差一點點了...就算要放棄也還是想瞭解一下另一條到底是什麼@@" 不過...其實利用fusion protein的方法已經有在考慮了...= =" 畢竟再耗下去也只是浪費時間罷啦我會在衡量的謝謝!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.127.215.12 ※ 編輯: Fourfish 來自: 140.127.215.12 (01/04 21:32)