Re: [問題] 請問pull down assay跟CO-IP的差別...
※ 引述《sezko (一般大學比較適合我)》之銘言：
: 請問一下這兩種方式的差別是什麼呢..??
: 是不是因為pull down assay並不是使用抗體所以才另外取一個名字的阿..??
: 兩者不都是觀察protein的interaction狀況嗎..??
: 還有pull down的專一性是否沒有CO-IP高呢..??
: 謝謝解答阿....拜託拜託.......
pull down 是把兩個protein在in vitro 時丟在一起
只要兩個protein有interaction 就可以抓在一起囉
測的是它們有沒有 "direct interaction"
不過跟生物體內的情況就有差啦
譬如說,若X與Y protein 是透過Z作橋樑
在pull dowm時就測不出來了
然而相反的,也許兩個protein雖然有direct interaction
但是其實在生物體內根本遇不到
也不能說它們有interaction
這時就要用其它方法去看了(例如看它們的co-localization)
Co-IP則是把protein利用trasfection的方法
送進生物體內去co-overexpression
(若是只送入其一,去抓內生性的另一個protein,就不是"co"了)
基本上是算in vivo的實驗,不過是overexprression的
所以也可能不是百分之百與體內相同
專一性問題?請別的大大幫忙回答囉!
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※ 編輯: melodyrabbit 來自: 59.121.123.44 (01/14 23:08)
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