Re: [問題] 5'RACE
※ 引述《huhu126 (canopener)》之銘言:
: ※ 引述《MPGTR (GOOD)》之銘言:
: : 請問有人在做5'RACE嗎
: : 我是要做出full length
: : 但是我很難拉到最長的那一條mRNA,也就是+1拉
: : 我做都有band,
: : 而且我有DNA的Seq, 所以我用DNA上的foward primer去看是否有更長的
: : 事實證明有, 但我5'RACE的band卻不是那麼長
: : 有沒有可以解決的方法,
: : 我是用termial transferase接上dT的方法
: : 難道要挑clone挑到死也沒有結果的埋頭苦幹嗎
: : 請高手幫我解答一下
: : 謝謝!!
我們是用 SMART RACE kit (BD,騰達行代理)
其實有滿多家都有在賣類似的產品
我要 fishout 的 gene 沒很長,約 1.5kbp,還滿好做的
個人認為是要看 mRNA 的量夠不夠多耶!
而且....如果你已經知道 forward primer 了
怎麼還需要做 5' RACE 呢?
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