Re: [求救] native gel(跑protein用)

看板Biotech (生命科學)作者ROKEE ( Beanazai)時間19年前 (2007/02/06 13:26)推噓1(1推 0噓 1→)

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※ 引述《philesazumi (苦悶阿)》之銘言： : 我家 acrylamide PAGE是用 biorad的mini protean 3 cell : 這個系統，厚片玻璃是8cm X 10cm，我要看protein native form的大小您的膠片厚度是? 0.75? 1.0? 1.5? (mm) 小弟我有點好奇，請問你們家有可以看native form分子量的marker嗎? 還是說用另外一個已知分子量的蛋白當比較基準點? : 所以不能用SDS，我有用google收尋過，有找到兩個recipe : 其中一個和current protocol內的一樣，但這兩個試的結果， : 都因為過熱而玻璃破掉（我有放在冰箱裡面跑，電壓也才30V，跑O/N） : 求適合我這個系統的recipe以及protocol 我的經驗是整個tank都放在大冰保裡，裡面灌滿冰塊(記得要死命壓實) 不含SDS的running buffer當然是用先冰過啦跑的時間大概是一般跑denature form的至少2.5倍以上基本上我用的 PAGE 跑膠系統跟你一樣，所以應該可以做出來 :DDDD 不過您的情況是熱到玻璃都「烤」破，小弟我有點難以想像耶 (OS:tank裡就跟溫泉一樣冒煙?那tank怎麼沒先融掉?) : 用NT$1000元整跟你買...........................緊急 : p.s. 要確定能用我才出錢...我可以假日到你的地方試能不能用用PAGE看native form分子量其實準確度並不是很好 (當然是要看您的目的和用途啦) 打個gel filtration不就省了這些麻煩? 至少玻璃不會破 XDDDD (原廠玻璃 - 厚：$500/片，薄：$220/片) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.213.101