Re: [問題] 關於檢測突變的方法
> (ND4 mutation in transitional cell carcinoma: Does mitochondrial mutation
> occur before tumorigenesis? C.Y. Tzen,Mitochondrion,2007,273-278)
> 作者用了三種方法來檢查:
> DNA sequencing
> RFLP
> DHPLC(denaturing HPLC)
> 而文中提到,三種方法的sensitivity是定序最低,RFLP其次,DHPLC最高
> 我想,sensitivity是指只需少量sample就能有結果吧
> a.但如果在知道mtDNA序列的情況下,用PCR放大不就沒有sensitivity高低的疑慮
> 還有,既然要找突變,那檢查的正確性應該比較重要
> 我以為定序應該最正確,因為兩個序列一對馬上就知道哪裡突變了
> b.問了朋友,說定序很容易出錯,但他也不會解釋,請問是為什麼呢?
> 然後這個朋友一直跟我說,和定序相比,RFLP就可靠多了
> c.但我覺得,要是突變不是發生在切位上的話根本就檢查不出來阿,怎麼會比較正確?
人的細胞動輒數百個粒腺體
每個都有DNA
也不是沒一粒腺體DNA都有突變
有的細胞帶有突變的粒線體多
有的則少
直接定序不一定可以找到突變
因此敏感度可能不是那麼好
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※ Origin: 生命科學 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw>
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