[問題] extraction用urea產生的cyanate問題

看板Biotech (生命科學)作者 (羅莉飼養中...)時間19年前 (2007/06/14 14:56), 編輯推噓0(004)
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是這樣的 我的protein在經E. coli表現後 破菌、離心後發現是位於inclusion body 為了之後跑膠的方便,我用8M urea不用guanidine HCl作extraction 卻發現protein由原來的兩條band (之前測,未破菌以western測得) 變成了連續由約10KDa一直延伸到gel最上面的100多KDa 的 數十條bands 請問這有可能是urea形成cyanate造成的嗎 那該如何避免產生呢 或是純化時能夠去除嗎? 感謝您的幫助!!! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.99.187

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另外請問,Ni-NTA column buffer pH7.9以上是為了什麼阿
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我是知道6.4~8.0是為了protein binding,但7.9就不懂了
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還有就是,冰上和常溫的pH有些差耶,該在冰上測嗎
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感謝您聽我這些笨問題喔
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文章代碼(AID): #16SEQHag (Biotech)
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