Re: [問題] 請大家救我的real time PCR...

看板Biotech (生命科學)作者 (I tried....)時間19年前 (2007/07/09 23:38), 編輯推噓2(201)
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※ 引述《kyokolove (心想事成)》之銘言: : 我最近做real time PCR : 當初這個基因我已經用RT-PCR 做過了 : 想說用real time能更準確比較 : 結果 我卻跑不出結果 每次都是undetect : 我一共用了兩種primer 一種是用primer3設計 : 一種是RTprimerDB這個網站提供的 : 可是兩個網站都呈現出一樣的結果--> undetect : 而且他們的曲線長的很奇怪 : 都是在threshold以下 一直呈現鋸齒狀而有向上的趨勢 : 可是一直到40個cycle前都沒有衝過threshold : 可是我的internal control GAPDH跑的很正常 : 所以排除機器或是材料的問題... : 再說正常的曲線應該是會突然有暴衝幾乎直線通過threshold的感覺巴 : 請問有人有這種經驗嗎 這樣的 曲線 undetect 代表什麼情況呢??? : 請大家幫幫我~~~~~~~ 我已經重做快兩個月了 Q ____ Q : 謝謝大家~~ 是否有把QPCR玩的產物拿去跑電泳? 你的產物預期多大? 這很明顯應該是沒擴增出來... -- My immature blog http://www.wretch.cc/mypage/aggaci -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.114.100.165

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我沒有拿去跑電泳耶... 我是設計P 200bp以內的
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請問template量最高可增加到多少阿 我目前是40ng
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跑電泳看看
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文章代碼(AID): #16abQJYl (Biotech)
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