Re: 菌液養太久(菌死光)plasmid會不會不見?

看板Biotech (生命科學)作者 (認真過每一天)時間18年前 (2007/12/05 22:39), 編輯推噓3(302)
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※ 引述《njp13 (.....)》之銘言: : 之前因為KIT可能受到污染 : 所以抽出來的plasmid都不見了 : 在得知送sequence可以直接送菌液過去 : 我上週日就從凍起來的stock抽一點放到2ml LB broth養 ^^^^^^^^^^^^^^^^^^ LB Broth養完之後咧?你該不會就整根eppendorf寄過去吧@@ 這樣不死才奇怪。 正常要 從stock沾菌,再用tip戳到LB Arga裡面(LB arga內含抗生素) 再寄出去。這樣即使廠商晚個2天才養菌也沒關係。 : 週一讓定序商收去作 : 隔了一天,今天(週三)定序商來電說抽不到plasmid : 我第一個直覺是 他該不會把我的菌養超久才作吧? : 所以就問他什麼時候幫我抽plasmid 什麼時候作定序的? : 他說週二還是今天幫我抽的 : 也就是說我的菌在那2ml 的medium裡面養了超過48小時(或更久) : 養這麼久 菌早死光了 : 但想一想 : 這樣的狀況下plasmid會因為菌死光而抽不到嗎? : 不知道plasmid抽不到會不會是因為菌養太久的關係呢? : 最近一直出問題 : 再不行就要整套砍掉重練了.. : 麻煩各位大大解惑阿 : 感謝! -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 134.208.24.2

12/05 23:05, , 1F
沒有耶..他是直接來收的..他有收菌液的sample型式 所以應該
12/05 23:05, 1F

12/05 23:07, , 2F
不用像您所敘述的那樣處理
12/05 23:07, 2F

12/05 23:10, , 3F
所以您的意思是 菌死掉plasmid抽不到是正常的囉?
12/05 23:10, 3F

12/05 23:50, , 4F
菌死掉抽不到是正常的啊,因為菌都死光了怎麼induce
12/05 23:50, 4F

12/06 05:43, , 5F
最好抽 plasmid 還要 induce 啦
12/06 05:43, 5F
文章代碼(AID): #17LhWN9E (Biotech)
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