Re: [方法] 請問注射cell line至小鼠產生腫瘤模式相關問題

看板Biotech (生命科學)作者datro ( )時間18年前 (2007/12/11 12:25)推噓0(0推 0噓 1→)

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※ 引述《oopa (11)》之銘言： : 最近要使用Lewis lung cancer cell打入B6小鼠(非免疫缺陷鼠)建立腫瘤模式 : 根據要看的參數,欲分別採用尾靜脈注射與皮下注射方式注入細胞,觀察腫瘤發生的情況 : 關於這樣的模式在執行上有些問題想請教: : 1.就目前個人搜尋的文獻中,皮下注射所使用的細胞量似乎都高於尾靜脈注射的細胞量, : 這樣的認知正確嗎?還是我個人文獻閱讀量不夠,或剛好挑選到同類文章所造成的錯誤 : 認知?若認知無誤,可能原因為何? 我以前實驗室sc打的細胞量比iv高就我的想法 (沒有論文佐證XD) 因為血液是供給養分的主要來源打皮下的時候cancer cell需要先促使angiogenesis才能獲得足夠的養分變成cancer cell 需要先建立microenviroment 在microenviroment建立前整個環境是比較不適合細胞生長的需要較多的細胞才能有足夠的殘存數目發整成完整的tumor 而不會在之前逆境中就死的差不多了而IV直接就是讓細胞離營養來源比較近雖然血液裡會其他因素會傷害 cancer cell ex.血流剪力但是只要當cancer cell能在organ中seeding 他離營養供給的器官近就比較容易發展 : 2.根據文獻所言,打入靜脈的總細胞液量從100ul-200ul不等 : (200ul是protocol建議的最大量) : 我有試過的結果,因為技術不佳,成功注入最多150ul左右,再多就推不進去了, : (應該不是打到別的地方,因為注射時其他部位沒有腫脹,且在注射量達150ul前都順暢) : 但因為該實驗無法等我技術完全OK後再進行, : 因此在使用相同細胞數目下,總體積減少,勢必細胞濃度會增加 : 請問細胞如果濃度較高對於老鼠本身是否有明顯影響? : 有好心人可以分享經驗嗎?有沒有可能細胞太濃讓小鼠血管栓塞? 關於腫瘤模式前一陣子有人有經驗分享過那位才是強者可以爬文看一下我老闆說IV 可以看尾巴顏色若是注射沒進去的話會造成尾巴有一段會是較淡顏色而沒有血色與其他部分有差距 : 3.靜脈注射所使用的針頭需要使用幾號針頭才不致使細胞破裂? : (目前練習使用26G針頭滅菌後的PBS) 我們是用胰島素短針 : 以上問題還請好心的高手們分享經驗與看法 : 感謝^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.25.118.125