Re: [求救] Cell seeding怎麼樣都不均勻.....
※ 引述《compaq (不是你)》之銘言：
: ※ 引述《wadewang (小龜)》之銘言：
: : 已經種到快發瘋了 看了之前的討論也沒有頭緒
: : 現在的情況是種10cm dish和75T flask都沒問題
: : 問題都出在3.5cm dish和 24well plate
: : seeding的方法是
: : 3.5cm dish是先加入適量medium 然後將細胞液均勻滴在dish上 總體積約1ml
: : 然後十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: : 24well plate則是將細胞稀釋到500ul的體積 然後均勻滴進去
: : 然後一樣十字搖法，前後3次左右3次，重複3次 搖晃時間差約為1秒
: : 下場就是細胞都聚在周圍
: : 中間細胞都很少
3.5的話 我是前後十次完了停下等液面停下再左右十次 兩個cycle
24well跟96well不用搖.........
你打的夠散 細胞自己會爬到旁邊 越搖越糟糕
: 我將細胞seeding在96 well的時候
: 也有遇過這樣的問題
: 那時候解決的方法是seeding完細胞之後放在室溫下約1hr
: (這個方法是我同學看到別人的protocol後告訴我的)
: 之後我seeding完細胞都會放在操作台上1hr之後再放到incubator
: 你可以試試看seeding完之後放在室溫一下
: 但不建議像96 well一樣放一個小時
: 因為細胞反而會聚集在中間
: 希望對你有幫助
: : 到底應該怎麼搖才能均勻阿
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如果孔子是那待沽的玉
我便是待斟的酒
用一生的時間 蘊釀自己的濃度
只為等待剎那的傾注
張曉風 釀酒的理由
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※ 編輯: boyo 來自: 221.169.50.122 (01/26 23:06)
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