Re: [求救] 用什麼選擇用GAPDH較好?或ACTIN較好?
※ 引述《qkenny (想變白的巧克力)》之銘言：
: 如題
: 在做PCR時
: 是否是 例如做代謝相關用ACTIN較好?
: 做structure相關用GAPDH做control較好呢?
: 謝謝
分享給你我的想法..希望有幫助^^
我在做realtime PCR時也有想過internal control的事情
其實是要看你的treatment會不會影響你所使用的internal control
也就是你所使用的internal control會不會因為你的treatment而改變
有幾種方式來選擇好的internal control
有一種是先定量RNA量, 所以在這種情況下..你的internal control應該要不會變
如果有變化..他就不能用..但是這種方式前提是RNA定量要很準..
我是用刪去法..我通常會用兩個不同pathway的internal control..
(Ex:actin是cytoskeleton,GAPDH是醣類代謝途徑中的一個enzyme)
如果data出來的pattern是相同的我才相信我的data..
所以並沒有說做代謝的都用什麼internal control或是做structure的都用GAPDH
我也有看到很多做糖尿病的用GAPDH當internal control
其他還有好多internal control可以選擇
像是HPRT. beta-2m, cyclophilin....
有個網址裡面有許多internal control的primer sequence..可以參考看看^^
http://medgen.ugent.be/~jvdesomp/genorm/
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