Re: [求救] 從人檢體中取出細胞
組織太小會分不出來
我們實驗室是collagnease作用20分鐘後
過100um mesh
再用percoll純化
是分離淋巴球的方法
※ 引述《fitman (幸福遙不可及.....)》之銘言：
: 最近老闆跟醫生有合作
: 主要是可以取到病人胃部的組織
: 我們主要是想要把組織中的細胞萃取出來
: 然後上flow去偵測我們所想要的目標細胞
: 但是目前卡在細胞取不出來
: 其實也不知道是不是組織太小塊了
: (醫生所給的組織大小約3~4mm 厚約指甲厚)
: 雖然可以一次拿到兩片
: 但是我覺得還是太小了
: 要取到可以上flow的細胞數量很困難
: 我目前的作法是把組織放到dish上
: 加上20um的medium
: 然後用刀片盡可能的切碎切小
: 之後將其放入小玻璃瓶
: 這時候大概有1cc左右的medium
: 然後加入collagenase還有heparin 37度一小時(參考paper)
: 然後過濾
: wash
: 之後直接去利用細胞計數盤去數細胞
: 可是細胞數量都很少
: 我不知道是我的操作有問題(這個實驗室之前都沒人做過~自己在試)
: 還是因為組織太小了所以細胞也會少
: 不知道板上的前輩有沒有人有好的方法可以把組織中的細胞取出
: 謝謝
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02/20 23:05, , 1F
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