[方法]幫個忙看一下~~純化protein
現在都在進行蛋白質純化的進度
可是binding到我要的protein少之又少= =
這讓我很困擾
我的作法是先將我要看的序列轉到BL21上面
利用它大量產生protein
養好小量後lysate
用sepharosre去binding我要的fusion protein
用PBS洗了幾次後再用elution buffer
從beads上洗下來我要的
可是每次跑SDS-PAGE都看不到我要的band.....救命ㄚ= =
有人有更好的方法可以告訴我嗎??
或者要注意的地方~~~感恩阿!!!
p.s.是不是在buffer裡加DTT會比較好一點@@
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