[求救] 染IF的時候non-specific binding很嚴重
我的tissue是用冷切 用1%bsa blocking 1hr
primary Ab 1:500 overnight
用pbst wash 10 min x5
secondary Ab 1:200 2hr
用pbst wash 10 min x5
但是染出來該亮的不亮 不該亮的非常亮
比如說 只會在核表現的 就只有核不亮 其他地方 連細胞質都亮晶晶
請問我應該修改哪個步驟呢?? 請大家給點建議吧
謝謝 :)
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