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Re: [求救]pcr 問題?

看板Biotech (生命科學)作者 (chi)時間17年前 (2008/09/18 10:03), 編輯推噓2(2推 0噓 11→)
留言13則, 3人參與, 7年前最新討論串2/2 (看更多)
※ 引述《charlielg (chi)》之銘言： : 是否可以利用pcr方法,將三段DNA序列連接起來成一段? : PS:這三段DNA序列兩兩之間有重疊序列 想再請問一下在整個pcr過程中template與primer添加細節與pcr條件是如何? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.121.155.210
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09/18 19:33, , 1F
跟一般PCR一樣吧, 至少我是如此弄出兩段合一.
09/18 19:33, 1F
推
09/19 19:49, , 2F
我是用taq，跑了兩次，第一次沒加template，跑7cycles
09/19 19:49, 2F
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09/19 19:50, , 3F
annealing溫度才50度而已（我的sample溫度設高反而有雜
09/19 19:50, 3F
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09/19 19:51, , 4F
band）第二次再加入primer，條件如一般pcr
09/19 19:51, 4F
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09/19 19:51, , 5F
上面template打錯，是primer，抱歉…
09/19 19:51, 5F
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09/19 19:52, , 6F
實驗室學姊也有直接一次把兩股template和primer一起加入
09/19 19:52, 6F
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09/19 19:53, , 7F
可以跑得出來
09/19 19:53, 7F
推
09/20 02:55, , 8F
我自己的也是前兩段, template和primer一起加入, 就可以.
09/20 02:55, 8F
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09/20 02:55, , 9F
然而, 後兩段一起加, 就不行...
09/20 02:55, 9F
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09/20 02:56, , 10F
其實我的目標是三段一起加入, 一次P完一整條..
09/20 02:56, 10F
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09/20 02:57, , 11F
paper上, 畫的簡單, 還是列了九段, 一次完成的理想圖...
09/20 02:57, 11F
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11/11 00:59, , 12F
其實我的目標是三段一起 https://daxiv.com
11/11 00:59, 12F
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01/03 16:45, 7年前 , 13F
其實我的目標是三段一起 https://daxiv.com
01/03 16:45, 13F
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5
[求救]pcr 問題?
charlielg
17年前, 09/17
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[求救]pcr 問題?
charlielg
17年前, 09/17
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