Re: [求救] real time PCR方法
※ 引述《b750117 (豬皮)》之銘言：
: 各位前輩好
: 小妹今年剛入碩班
: 因為要作real time PCR
: 但 因為非本科系的
: 教授要我抓real time PCR的條件
: 請問 是要抓什麼條件阿
: 還有 教授有給我一個GADPH的primer
: 我只知道那是一個houskeepimg gene
: 那是有什麼功能??及在real time PCR中我應該怎麼用呢
: 又有什麼意義呢??
: 謝謝
覺得既然是非本科系的學生
應該先去了解real time PCR的原理
http://www.appliedbiosystems.com.tw/
上列網址為ABI中文原廠網站
右邊可以看到有個中文線上科技講座
裡頭會講得很詳細
新的primer來要先抓cDNA濃度
請以系列稀釋抓取最適合的Ct值
Housekeeping gene: A gene involved in basic functions needed for the
sustenance of the cell. Housekeeping genes are constitutively expressed
(they are always turned ON).
它主要校正實驗中的誤差，
你的target gene會隨著你的實驗處理而表現量有所變化
但是以理想情況下它是不會的
請問實驗室real time PCR是用哪個系統的？
儀器是哪一廠牌哪一機型的呢？
如果不知怎麼做...
其實也可以跟你所使用的reagent/儀器的代理或國內原廠聯絡
會有specialist幫你解決疑問的
以上淺見
若有任何錯誤請各位前輩不吝指正！
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