Re: 關於DNA polyacylamide
※ 引述《MDPV (鴨小病毒)》之銘言：
: ※ 引述《MDPV (鴨小病毒)》之銘言：
: : 各位前輩
: : 不知道有沒有人有使用polyacylamide 跑DNA
: : 因為我的dna band很小
: : 所以要用此方法
: : 不過已經試了好多方法
: : 不知誰可以救我一下
: : 謝謝~~~~
: : 可以附上protoc嗎
: sorry 我沒有寫清楚~~~
: 我DNA polyacylamide濃度如下:
: GEL% 20%
: 30% acylamide 8ml
: H2O 1.6ml
: 5x TBE 2.4ml
: 10%APS 200ul
: TEMED 10ul
: 以65V預跑30分鐘後，loading sample後，以65V跑4.5小時
: 可是我出現的問題如下:
: 1.我製作出的膠孔洞中會有類似纖維狀的東西 無法讓我loading東西
: 2.看不出想要的band 連dna marker都看不見
: 3.請問各位前輩 我需要像跑SDS-PAGE有上下膠嗎
: 4.如果我的dna只有83bp，我大概要跑到什麼位置?
: 因為對實驗沒接觸過 所以煩請各位幫忙 謝謝
謝謝各位前輩給我的意見
我會在試試看
我現在已經用2%Agrose 0.5x TBE跑
可是還是看不到83bp的band
所以才想說用polyacylamide跑跑看 可是都不見成果
老師很急著要data 可是實驗室有學長姊們會的
所以我上網查到的配方如上
所以 可以請前輩們慷慨給我其他可行的配方嗎
謝謝~~~
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