[討論] ligation
一般在做ligation時都是vector + insert 去進行反應
如果說現在我有2個insert,把vector + insert 1 +insert 2,加在一起
ligase有辦法成功的將這三者接成一個環狀的plasmid嗎?
(只是想知道這樣能否成功,不討論先接一個insert,再接另一個喔)
(不考慮in frame,cutting site...etc這些問題的話)
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不是我想偷懶啦XD
最近做了一個clone,裡面有insert 1和insert 2
下一步是搬到另外一個vector(兩端的cutting site是一樣的BstXI)
好死不死,insert 1和insert 2中間發生mutation,跑出一個BstXI
這下冏了,我無法用BstXI將 insert1 - insert2 整個搬出來。
原本的規畫
vector1: -------BstXI---insert1-----------insert2---BstXI----
mutation後的結果
vector1: -------BstXI---insert1---BstXI---insert2---BstXI----
這樣能理解嗎? 我講得好亂>__<~
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◆ From: 134.208.24.2
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