Re: [求救] 分離小鼠脾臟Macrophage
看板Biotech (生命科學)作者oypicard (Just do it!)時間17年前 (2008/11/12 02:16)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串2/2 (看更多)
※ 引述《onlyone0419 (期待)》之銘言：
: 請問有大大做過分離spleen macrophage的實驗嗎?
: 我是將spleen磨碎後
: 先用RBC lysis buffer將紅血球打破
: wash 3次後用貼複的方式培養(RPMI-1640)
: 可是他就是不給我貼= =，不像腹腔Macrophage那麼會貼...
: 我1、2、4小時都有鏡檢，都幾乎沒貼
: 後來放整晚也不貼...
: 實在是傷腦筋@..@
: 希望有經驗的大師們能傾囊相授<(_ _)>
我之前有做過類似的實驗,
純化的是CD11c+的細胞。
我的方法是先用histopaqe分層細胞,
histopaqe處理之後,
約有20-30% CD11c+的細胞,
而CD11b+也約為20-30%(不確定)。
再用MACS純化CD11c+的細胞,
或者是用flow sorting。
不過splenic macrophage用貼壁的方法,
我印象中好像沒有看過有人這麼做,
當然也有可能是我看得paper不夠多,
以上希望對你有些幫助,
有錯也請指正。
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我達達的馬蹄是美麗的錯誤
我不是歸人，我是馬......
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◆ From: 218.32.128.15
※ 編輯: oypicard 來自: 218.32.128.15 (11/12 02:22)
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