[求救] 萃取protein的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (榤)時間17年前 (2008/11/20 18:24), 編輯推噓4(403)
留言7則, 5人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
之前萃取蛋白是加入PBS刮下來的 可是老師覺得 用trypsin打下來會比較好 測出來的濃度 的確 比用加入PBS刮下來的濃度高太多 但是 trypsin本身就是一種蛋白 這樣子的作法 不會影響細胞蛋白嗎? 老師覺得不會 但是 因為跟先前用PBS刮下來測出的濃度差太多了 (用PBS的作法,濃度大約在200~300ug/ml,用trypsin的作法,濃度在800~1400ug/ml) 所以我還是很懷疑用trypsin萃蛋白的作法>"< 有人可以幫我解答嗎? 謝謝大家~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.120.130.200

11/20 18:55, , 1F
我是討厭trypsin用於收protein的,你考慮同樣ug做WB給老師看
11/20 18:55, 1F

11/20 19:35, , 2F
如果沒有要做和ATTACHMENT相關的PROTEIN應該比較沒差
11/20 19:35, 2F

11/20 19:36, , 3F
可是我不管PROTEIN拿來做什麼實驗~都是採用括的
11/20 19:36, 3F

11/20 19:40, , 4F
我之前也用刮的,但是老師硬是要用trypsin打下來/m\
11/20 19:40, 4F

11/20 21:15, , 5F
我做WB,都是用RIPA,再刮下來,不建議用trypsin
11/20 21:15, 5F

11/23 01:23, , 6F
buffer都還要加protease inhibitor了 trypsin再加進去..
11/23 01:23, 6F

11/23 01:23, , 7F
根本意背道而馳
11/23 01:23, 7F
文章代碼(AID): #199JhX5b (Biotech)
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