[求救] cloning的問題

看板Biotech (生命科學)作者 (咕嘰)時間17年前 (2008/12/08 00:22), 編輯推噓1(100)
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實驗流程大略如下: ligation以及圖菌後 隔天長出colony 挑單一colony做cloning PCR 檢測是否目標基因有接進vector中 而我遇到的情況是cloning PCR檢測有看到目標基因被放大 而我將該菌珠培養O/N後 隔天抽plasmid 再做enzyme digestion 結果卻切不出那段基因出來 而且plasmid的位子好像在空的vector位子 送定序出來的結果也很詭異 ps我利用vector上的CMV30為primer 定序結果不到沒有我塞進去的gene 序列也跟vector不同 請問有人遇到跟我類似的狀況嗎?? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 125.225.135.239

12/08 14:30, , 1F
有一種很小的機率是 你挑colony時沾到了沒進去的plasmid
12/08 14:30, 1F
文章代碼(AID): #19E_WvqU (Biotech)
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