[求救] 關於 western 的 band
想請較各位
最近在跑 cytochrome c
所以必須要抽細胞質的protein
可是發現跑出來的 band 會呈現以下情形
1. http://w74429.pixnet.net/album/photo/106668620
第一條是 GAPDH 第二條是 cytochrome c
兩個protein是同一片膠同一批sample (就是一片膠看兩個potein)
G3 跑出來的 band 很漂亮
不過 cytochrome c 卻很醜@@"
一開始原以為可能抗體太強,壓片時間太久所以導致band很粗
不過後來發現 如果只壓個10秒20秒之類的
band 一樣很粗...
但是就會像是黑黑空格沒有補滿的感覺
有點像這樣 (類似第一個 sample )
http://w74429.pixnet.net/album/photo/106668633
不過是八個sample都會這樣..
這看起來又不像是抗體太強,而燒掉的白色空格
已經試很多次了還是這樣@@"
之前有學姐建議我跑高一點 % 數的膠
我有試過12% (照片是12%膠跑出來的圖)
然後也有試過15%,但是15%也是一樣的結果...
我們家的抗體是 BD ( 編號556433 )的 cytochrome c
然後我一抗都只有4度C overnight 10hr 而已
請問有經驗的各位
這有可能是什麼問題呢?
該怎麼改進呢? 謝謝大家的指教!!
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◆ From: 220.229.173.66
※ 編輯: linwei 來自: 220.229.173.66 (07/28 02:48)
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