[求救] 請問關於transfection

看板Biotech (生命科學)作者 (我家有隻可愛小都)時間16年前 (2009/11/13 19:58), 編輯推噓0(000)
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請問,使用lipofectamine做transfection 和用virus infection, 結果有何不同呢? 以下是我對此二方法的想法:(可能有很多錯誤請大家幫我指正) 假設我要將一個基因送入細胞株讓他表現. 一般可選擇可在真核細胞表現的vector(ex:pcDNA3)或 virus vector(ex:retrovirus vector)來攜帶此基因. 假設用pcDNA3攜帶此基因,再用lipofectamine送入細胞, 經過抗生素篩選一段時間,可得stable cell line. 如此可將此珠細胞冷凍保存,每次實驗需要再取出培養. 假設用virus vector攜帶此基因,則需先送入packaging cell, 製造virus, 再去infection 目標cell. 而被感染的細胞雖然會表現此基因,但細胞被病毒感染不久後也會死亡. 似乎無法穩定保存. 每次需要此細胞時須從vector送入packaging cell步驟開始... (好像沒看過直接用lipofectamine直接把virus plasmid送進目標細胞株,why?) 這樣看起來好像使用一般真核細胞表現vector的方法比較簡單也比較能保存. 但是virus infection卻也是實驗是很普遍的方法. 請問大家這兩種方法transfection的結果差異或優缺點在哪裡呢? 不好意思若我有些觀念錯誤請大家幫忙指正,謝謝! :) ※ 編輯: anchi 來自: 125.231.224.69 (11/13 20:00)
文章代碼(AID): #1A_Kdbw0 (Biotech)
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