Re: [求救] tricine SDS PAGE
※ 引述《power384 ()》之銘言：
: 想請問一下版上的各位
: 為什麼tricine SDS PAGE它需要分內外兩種buffer？
: 有什麼功用在嗎？
: 謝謝回答
看來你是要分離大約小於 30 KDa 的蛋白，
若是你用一般 SDS-PAGE 的話，因為從頭到尾都是用相同 Running Buffer
電流「幾乎」穩定，所以小的蛋白大家都跑得差不多快，分不開。
若是利用 tricine SDS-PAGE，它是利用 Cathode buffer 跟 anthode buffer
我想是你的跑膠系統長得讓你覺得是加在「內」或「外」
說是內外buffer並不恰當
這兩個buffer 差在一個有加 Tricine 一個沒有
還有就是 pH 不一樣
這樣一來，會造成 fake ionic strength gradient
就會造成電流在 cathode 跟 anthode 附近速度不一樣
小的蛋白就可以分得比較開（應該說是超級開，good resolution)
換句話說就是在百分比大約10%的 SDS-PAGE 30KDa 以下根本就是所有的band連在一起
但是用 tricin SDS-PAGE 的話，可以分得很開
若是你要的蛋白是 high hydrophobic，用tricin SDS-PAE 更棒
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