[求救] 請問lentivius的問題~~十萬火急~~畢業困難
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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板上各位好
最近~~我開始使用lentivirus 系統~~我從中研院訂購了幾組shRNA~~再lentivirus前
先將幾組shRNA利用transfection的方式將plasmid送到HEK-293T細胞,做knockdown
照理來說,會在western blot測試中,看到目標蛋白被抑制,可是幾次結果下來,
並未看出差異。
我是使用invitrogen的Lipofectamine 2000將plasmid送入細胞,48小時候收蛋白,
過程中並無篩許,只有對照pEGFP-plasmid做為control。
而這幾組shRNA中研院的測試結果都是有效的,所以在我pre-test的結果來看,該己
組shRNA就沒有效果,請問各位前輩我有沒有忽略什麼細節或少考慮了什麼。
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