[求救] 請問vector與insert序列中皆有ATG?

看板Biotech (生命科學)作者 (熊皮)時間16年前 (2010/04/30 22:12), 編輯推噓1(106)
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請問各位先進 目前有一vector cloning site之前有設計一組ATG, 而手邊要使用的insert 其起始序列也含有ATG, 接入之後 經過計算 此兩個ATG是不同的frame. 1. 請問這時的蛋白質表現是會為何? (僅有vector的 僅有insert的 還是皆有?) Insert的部份能夠表現出預期的蛋白質嗎? 2. 若是不行的話 請問各位有何建議? 如:需重設計引子 然後使用vector的ATG? 換掉vector? (由於實驗限制 這點暫不考慮) ......... -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.96.151

04/30 22:30, , 1F
看看有沒有切點是不會影響到frame的?
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04/30 22:48, , 2F
我認為在強大的promoter下,兩者皆會有,在不inframe時
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04/30 22:49, , 3F
會被你所使用的抗體自動忽略
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05/01 11:42, , 4F
這情形我碰過 會從vector的開始 想辦法把vector上的ATG拿掉
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05/02 03:32, , 5F
我的話會重新設primer,使用vector上的ATG
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05/02 04:07, , 6F
如果vector的ATG到你target gene的ATG之間序列不會太長
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05/03 22:31, , 7F
謝謝回答
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文章代碼(AID): #1BskLL1Q (Biotech)
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