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[求救] invasion assay

看板Biotech (生命科學)作者 (iosteven)時間14年前 (2010/09/28 02:03), 編輯推噓0(0推 0噓 10→)
留言10則, 1人參與, 最新討論串1/2 (看更多)
最近利用肺癌細胞株CL1-5要加inhibitor看它的變化 要開始作invasion assay的實驗(我有查過kit 但實驗室有matrixgel老師不會答應買的..) 於是去看了一些的文獻以後有一點不甚了解 就是要coating matrix gel的步驟是 利用6 well的chamber來進行 我看到的流程是matrixgel :SF medium = 1:4 -->這常見嗎? 然後注入一定的量以後等它乾--> 要注入多少量才夠又不會太厚? 有的說放進37度的incubator 1hr，還有是要coating以後放到4度C冰箱 overnight 不知道該如何下判斷? 很多paper沒寫得很詳細= = 請大家幫幫我.... 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 118.171.118.8
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09/29 13:24, , 1F
我講一下我們實驗是的作法
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09/29 13:25, , 2F
首先 25%的確是常使用的 但因細胞INVASION能力不同 故也可改
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10% 因為我們家是用24well用的CHAMBER 因此不知道量適不適合
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100μL/1 chamber/37度西 incubator 6hr
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well 跟 well 中間加入 DPBS 使其保溼
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這是要避免他太乾 形成凸面 這樣細胞會分佈到管壁旁邊！
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incubate 完後 加入 10^5 cells/200μL/1 chamber
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然後置入culture media之中 當然這些過程都是要避免氣泡產
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生的 希望這樣是有幫助到你！
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網路上其實也有http://ppt.cc/W4Sy 可參考的作法！
09/29 13:40, 10F
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iosteven
14年前, 09/28
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