[求救] 15% SDS gel

看板Biotech (生命科學)作者 (...)時間15年前 (2011/02/10 15:13), 編輯推噓3(304)
留言7則, 3人參與, 最新討論串1/3 (看更多)
最近在跑15% SDS gel時 跑到最後dye跟11kDa的marker之間會有一層淡藍色出現 感覺就像dye暈開一樣 由於我自己的protein為11kDa 做完western壓片後會壓不到band 或是band呈現波浪狀 (感覺protein沒跑完卡在一起的樣子) 要請教各位這是哪裡出了問題 謝謝 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 163.15.154.12

02/10 15:57, , 1F
煮protein的時候沒有煮的很完全會造成dye和蛋白分開
02/10 15:57, 1F

02/10 15:58, , 2F
可用95度以上煮10mins,並立刻跑膠
02/10 15:58, 2F

02/10 15:59, , 3F
western的部分,若尚未跳海,可再跑開一點
02/10 15:59, 3F

02/10 16:01, , 4F
有可能你鑄膠時下半的膠凝固的不好
02/10 16:01, 4F

02/10 16:01, , 5F
跑比較小的蛋白的時候可以考慮做長的膠
02/10 16:01, 5F

02/10 16:30, , 6F
個人經驗測漏的水要吸乾,否則跑到底下時會怪怪的
02/10 16:30, 6F

02/10 21:02, , 7F
個人經驗,高濃度PAGE可是小分子蛋白看不到,是APS不夠新鮮!
02/10 21:02, 7F
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