[求救] 想要請問從濾紙上回溶DNA, 為何transform後得不到conony?

看板Biotech (生命科學)作者 (狗狗)時間14年前 (2011/06/08 18:35), 編輯推噓6(603)
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大家好: 其實我是幫外國人問的(因為是我寄過去的) 我把抽好的DNA 溶在無菌水當中 之後測了濃度 (平均4ug/ml) 取了20ul 滴在濾紙上 然後裝在小的滅菌袋後密封 用航空信件寄出去了 寄到了澳洲 (差不多兩個禮拜以上) 之後對方告訴我 他transformation 之後沒有colony 請問有什麼原因嗎? 還是說乾脆寄 eppendorf 過去阿? 謝謝大家 m(_ _)m 發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出 以方便板友幫您追蹤問題 ----請將上列注意事項以 ctrl + k 刪除後開始編輯文章---- -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.94.81

06/08 18:37, , 1F
如果plasmid沒有問題的話就是他用太多水回溶了(菸)
06/08 18:37, 1F

06/08 18:43, , 2F
應該是你的DNA濃度太低對方的competent cell效率太低
06/08 18:43, 2F

06/08 19:07, , 3F
濃度太低了吧 試著提高濃度 如果寄eppendor比較麻煩...
06/08 19:07, 3F

06/08 19:21, , 4F
我至少都滴2~5 ug,會比較保 險
06/08 19:21, 4F

06/08 19:30, , 5F
不好意思 更正一下,是4ug/ul,total 80ug了!!
06/08 19:30, 5F

06/08 19:52, , 6F
自己再用樣的濃度製備一張,隔天自己transform一次看看囉
06/08 19:52, 6F

06/08 19:52, , 7F
如果你做的出來,就代表是對方的問題 (菌種,回溶...)
06/08 19:52, 7F

06/09 18:37, , 8F
有沒有告訴他是抗甚麼的壓...別拿抗amp去塗kana...
06/09 18:37, 8F

06/10 12:37, , 9F
之前拿過人家寄來的 也是滴在紙上回溶 做好幾次才成功
06/10 12:37, 9F
文章代碼(AID): #1Dxr1vhh (Biotech)
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