Re: [求救] High Range DNA Ladder
我想你的目的應該是, 要確認這個接好的15 kb質體是不是正確地被構築
如果是這樣, 其實你應該先確認你的質體上限制脢的切位
選擇適合的數種限制脢組合來切割你的質體後, 再跑電泳確認是否如預期大小
例如本來15 kb大小的質體預期被...
BamHI切割後, 會變成 1 kb + 8kb + 6 kb
SalI切割後, 會變成 3 kb + 5 kb + 7 kb
XbaI切割後, 會變成 5kb + 8 kb + 2 kb
XhoI+EcoRV切割後, 會變成 2 kb + 3 kb +10 kb
等等, 然後分別進行酵素反應後, 再跑電泳確認是否如你的預期, 以這種方式來確認
所以你最好先知道你接到pBR322的各個片段中, 有甚麼酵素切位
如果有某個片段是你不知道序列, 所以無法預測酵素切位的, 也沒關係
至少你一定知道pBR322, DsRed...這些的序列, 就可以用以選擇該使用那些酵素了
因此其實你不需要買那個大片段的marker, 因為你們似乎沒有適合的電泳設備
然後分析大片段又比較麻煩跟不準確
而且環狀跟線狀DNA電泳速率不同, 是沒有辦法互相比較的
(質體一定要經過限制脢切割後才能與線狀DNA marker比較)
這是我的建議, 歡迎討論 :)
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 36.229.210.193
推
04/05 19:11, , 1F
04/05 19:11, 1F
→
04/05 19:12, , 2F
04/05 19:12, 2F
→
04/05 19:13, , 3F
04/05 19:13, 3F
→
04/05 19:13, , 4F
04/05 19:13, 4F
→
04/05 19:14, , 5F
04/05 19:14, 5F
→
04/05 19:15, , 6F
04/05 19:15, 6F
→
04/05 19:16, , 7F
04/05 19:16, 7F
→
04/05 19:17, , 8F
04/05 19:17, 8F
→
04/05 19:18, , 9F
04/05 19:18, 9F
→
04/05 19:19, , 10F
04/05 19:19, 10F
推
04/05 19:21, , 11F
04/05 19:21, 11F
→
04/05 19:22, , 12F
04/05 19:22, 12F
→
04/05 19:25, , 13F
04/05 19:25, 13F
→
04/05 20:15, , 14F
04/05 20:15, 14F
→
04/05 20:18, , 15F
04/05 20:18, 15F
→
04/06 01:04, , 16F
04/06 01:04, 16F
推
04/06 01:06, , 17F
04/06 01:06, 17F
→
04/06 01:07, , 18F
04/06 01:07, 18F
討論串 (同標題文章)
完整討論串 (本文為第 2 之 2 篇)：
Biotech 近期熱門文章
PTT職涯區 即時熱門文章