[求救] Ecoli內質體含量過少
最近從中研院購入shRNA,且含2組 negative control(shGFP,shRFP)
目前一切正常,惟有這兩組negative control(shGFP,shRFP)無論麼抽
所得到的plasmid產量都大概是實驗組的1/5而已,所有培養& mini prep.的條件都
與實驗組一樣
[incubate 16-18h+shakeing 200rpm / TB(Amp plus100ug/mL / Qualegen kit]
可以確定的是,我已經將抽mini菌液的量提高到4mL,也確定離下來的菌非常多。
但是抽出來的量還是低於實驗組,最近即將要抽大量,想在抽大量前解決此事。
剛爬文後有些頭緒,但還是麻煩各位先進再給個建議。
1.是否為菌種老化,但菌種老化不是跟生長速度有關?會造成質體產量過少嗎?
2.抽質體時P1,P2,P3體積拉大,讓lyse效果增加?? 純粹個人想法
最後想問,是否有實驗室剛好有negative control shRNA菌種,可否分一些給我培養。
ps我人在台北石牌這
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