[求救] 利用BSA與奶粉blocking步驟是否一樣?

看板Biotech (生命科學)作者 (唉唷喂~)時間12年前 (2013/05/08 13:50), 編輯推噓3(307)
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大家好 我們實驗室目前是用安佳脫脂奶粉+TBST blocking 室溫1小時後上一抗 抗體也是泡在含0.1%奶粉的TBST中 不reuse 我之後會做到磷酸化抗體 所以會用BSA blocking 網路查一般是使用 5% BSA blocking 我的問題是 5% BSA 大家是用PBST or TBST配製? 也是blocking 1小時嗎? 抗體泡在5% BSA後可以reuse使用 是保存在4度就可以了? 請問可以reuse幾次? 抱歉 問題有點多 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 120.114.181.44

05/08 13:58, , 1F
已經知道要用BSA了就不要用"P"BST囉!!
05/08 13:58, 1F

05/08 14:11, , 2F
雖然磷酸化抗體建議用BSA,但CST的好幾支用milk+PBST比BSA+
05/08 14:11, 2F

05/08 14:11, , 3F
TBSorTBST好看多了
05/08 14:11, 3F

05/08 14:15, , 4F
也有遇到用milk不ok,BSA也更糟,最後用non-peptide解決的
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05/08 17:44, , 5F
Datasheet寫可以用milk的就用~有些磷酸化抗體可用
05/08 17:44, 5F

05/08 23:53, , 6F
小弟不才~請問為何用BSA就不要用PBST了呢?
05/08 23:53, 6F

05/08 23:54, , 7F
還是因為要看磷酸化蛋白,所以才不要用PBST?
05/08 23:54, 7F

05/09 00:16, , 8F
主要是怕PBST干擾啦!!
05/09 00:16, 8F

05/09 20:18, , 9F
用TBST配/我們lab 若是reuse會放-20
05/09 20:18, 9F

05/11 17:25, , 10F
tbst/存-20reuse次數應該是看你抗體好壞吧。
05/11 17:25, 10F
文章代碼(AID): #1HYUUppb (Biotech)
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