Re: [求救] 利用BSA與奶粉blocking步驟是否一樣?
※ 引述《jajshigogo (唉唷喂~)》之銘言:
: 大家好
: 我們實驗室目前是用安佳脫脂奶粉+TBST blocking 室溫1小時後上一抗
: 抗體也是泡在含0.1%奶粉的TBST中 不reuse
: 我之後會做到磷酸化抗體 所以會用BSA blocking
: 網路查一般是使用 5% BSA blocking
: 我的問題是 5% BSA 大家是用PBST or TBST配製?
: 也是blocking 1小時嗎?
: 抗體泡在5% BSA後可以reuse使用
: 是保存在4度就可以了?
: 請問可以reuse幾次?
: 抱歉 問題有點多
抱歉 借文章一問
想請問板上各位先進
文中提到抗體是泡在0.1%牛奶內,
請問如果我是泡在一般的blocking buffer (5%牛奶)
會有影響嗎?
另外,有人用1% 也有人用 5% BSA來blocking,有什麼差別嗎?
且有一說用BSA的blocking時間需要久一點,請問有確切的condition嗎? (時間/溫度)
and我的某支抗體(Santa)用1% BSA blocking以及泡抗體
結果超髒,是否該改用5%BSA再試試看
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◆ From: 123.192.112.119
※ 編輯: cmublue 來自: 123.192.112.119 (05/11 20:26)
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