Re: [求救] 利用BSA與奶粉blocking步驟是否一樣?

看板Biotech (生命科學)作者 (BLUE)時間12年前 (2013/05/11 20:24), 編輯推噓2(206)
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※ 引述《jajshigogo (唉唷喂~)》之銘言: : 大家好 : 我們實驗室目前是用安佳脫脂奶粉+TBST blocking 室溫1小時後上一抗 : 抗體也是泡在含0.1%奶粉的TBST中 不reuse : 我之後會做到磷酸化抗體 所以會用BSA blocking : 網路查一般是使用 5% BSA blocking : 我的問題是 5% BSA 大家是用PBST or TBST配製? : 也是blocking 1小時嗎? : 抗體泡在5% BSA後可以reuse使用 : 是保存在4度就可以了? : 請問可以reuse幾次? : 抱歉 問題有點多 抱歉 借文章一問 想請問板上各位先進 文中提到抗體是泡在0.1%牛奶內, 請問如果我是泡在一般的blocking buffer (5%牛奶) 會有影響嗎? 另外,有人用1% 也有人用 5% BSA來blocking,有什麼差別嗎? 且有一說用BSA的blocking時間需要久一點,請問有確切的condition嗎? (時間/溫度) and我的某支抗體(Santa)用1% BSA blocking以及泡抗體 結果超髒,是否該改用5%BSA再試試看 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 123.192.112.119 ※ 編輯: cmublue 來自: 123.192.112.119 (05/11 20:26)

05/11 20:38, , 1F
順便問有人用過這個產品嗎?HyBlock 1 min Blocking
05/11 20:38, 1F

05/11 20:39, , 2F
號稱一分鐘 非蛋白blocking 還可用在IHC 頗神
05/11 20:39, 2F

05/11 20:39, , 3F
不知道有沒有人用過 謝謝大家!!
05/11 20:39, 3F

05/11 21:25, , 4F
我會用5% BSA BLOCKING 0.5~1%泡抗體 參考看看
05/11 21:25, 4F

05/11 21:26, , 5F
5% BSA blocking RT 一小時以上吧 看你趕不趕時間
05/11 21:26, 5F

05/11 21:56, , 6F
5% BSA不趕時間我就室溫丟著3~4小時吧,趕的話至少一小時
05/11 21:56, 6F

05/13 16:28, , 7F
HyBlock 我們有在用,聽起來超神,不過就只是1分鐘跟
05/13 16:28, 7F

05/13 16:28, , 8F
1小時差別,該髒的一樣髒
05/13 16:28, 8F
文章代碼(AID): #1HZZY9YY (Biotech)
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