[求救] real-time PCR Ct值疑問
發問時請注意,若是要問實驗相關的問題,請將實驗的步驟、所用的條件大致列出
以方便板友幫您追蹤問題
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每次做real-time PCR,做四重複,結果Ct會產生兩兩分群的現象,也就是數值兩個兩個
相近,造成取值非常的困擾,但是melting curve卻是很有專一性的,之前懷疑是pipet error的
現象,所以嘗試放大體積來加cDNA,可是結果沒有甚麼差異!?請問有板上的大大有有類
似的經驗嗎?
另外加試劑的順序,氣泡存在與否,是不是會造成影響呢?
我的順序為先加水、sybrgreen、Primer混合成一管mix,分別加入8聯排,再加入
cDNA,希望大家可以幫幫我啊QQ
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