[方法] 抑菌圈實驗問題

看板Biotech (生命科學)作者 (panyuyun)時間12年前 (2013/08/20 01:33), 編輯推噓2(207)
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想請問一下有做過抑菌圈實驗的前輩 我查到標準實驗的步驟是直接購買commercial的抗生素paper disk 自備sample的話可將sample浸泡在paper disk中 或將paper disk至於agar plate上,再滴上sample 我的問題有以下幾個: 1. 將細菌接踵至agar plate上,我查到兩種做法 一是取綿紗布浸泡在10^8 CFU/mL的菌液中,再分三次塗抹在agar plate 另一是取培養o/n的菌液100 uL至agar plate,以三角玻棒均勻塗抹 想請問兩種方法的效果? 沒用過綿紗布,操作三角玻棒比較熟悉 那我應該取多少濃度的100 uL菌液塗盤較恰當呢? 2. 之前做其他抑制圈實驗用過的paper disk是厚的 (一面有點像很紮實的棉花的質感,一面是像一般濾紙的質感) 但爬文發現有人說可以直接用一般濾紙用打洞機打就好 想請問兩者的差別? 3. 我的sample是非常黏稠的液體,呈現有點膠狀的狀態 感覺不太可能浸泡到完全吸收 如果要將sample滴在agar plate上的paper disk 體積建議多少? 或是有沒有人做這個實驗是可以直接滴10 uL在agar plate上的? 非常感謝大家耐心看完這篇落落長的問題文 也跪求有經驗的前輩幫忙解答了 <(_ _)> 謝謝~ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.193.137

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1 我們是將菌液與降溫的agar混合後快速倒到plate裡
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2 是用電泳用的濾紙直接以打洞機打洞 接著用鎳子把 paper
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disk放到已冷卻(並吹乾)的 plate中間 最後滴上 10uL待測物
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倒置培養 (吹乾和倒置都是避免plate表面的液體流來流去)
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液體非常黏稠可以考慮5uL 只要確定可以均勻散布在disc上即可
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好~ 謝謝您!! 我會再試試!
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按CLSI標準應該是將菌液調整成0.5的McFarland值再塗抹
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然後用swab塗即可
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10/07 05:30, , 9F
推樓上
10/07 05:30, 9F
文章代碼(AID): #1I4bRifN (Biotech)
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